牛血清白蛋白的提取与鉴定的设计方案;但你说的一些方法我根本就不能完成!是否还有简单的提取与鉴定的方法,如:用电泳的方法来分离用BCA法来鉴定怎么操作!

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/11 16:17:57
牛血清白蛋白的提取与鉴定的设计方案;但你说的一些方法我根本就不能完成!是否还有简单的提取与鉴定的方法,如:用电泳的方法来分离用BCA法来鉴定怎么操作!

牛血清白蛋白的提取与鉴定的设计方案;但你说的一些方法我根本就不能完成!是否还有简单的提取与鉴定的方法,如:用电泳的方法来分离用BCA法来鉴定怎么操作!
牛血清白蛋白的提取与鉴定的设计方案;
但你说的一些方法我根本就不能完成!是否还有简单的提取与鉴定的方法,如:用电泳的方法来分离用BCA法来鉴定怎么操作!

牛血清白蛋白的提取与鉴定的设计方案;但你说的一些方法我根本就不能完成!是否还有简单的提取与鉴定的方法,如:用电泳的方法来分离用BCA法来鉴定怎么操作!
牛血清白蛋白热乙醇法提取工艺:分离血浆,在牛血中加入枸橼酸钠离心,提取,将收集的血浆放入夹层反应罐内,加热加入辛酸钠,缓慢搅拌,温度在55℃~65℃,加入盐酸调pH值至4.6.5,然后加乙醇,过滤,脱盐和浓缩,冻干为成品.具体为以下步骤:A、分离血浆,取新鲜牛血放入带制冷功能的离心机中,加入血量的10%的浓度为3.8%的枸橼酸钠,离心,温度在2℃以下,分离血浆、血球,收集血浆,血球另用; B、提取,将血浆放入夹层反应罐内,夹层内加热水,边加热边加入牛血清容积的0.2-0.3%的辛酸钠,缓慢搅拌,温度在55℃~65℃,溶解后调PH值,加入浓度为1摩尔的盐酸,将PH调至4.6.5,然后加入血清总量的5.5%的浓度为95%的乙醇,过滤,滤渣弃之; C、脱盐和浓缩,将滤液用20000分子量以下的超滤器洗脱盐类及其它小分子杂质,同时进行浓缩; D、冻干,将浓缩液按冻干曲线冻干,即将浓缩液迅速冷却至-40℃,持续1小时左右,升到-25℃,持续10-20小时,再缓慢升温到0℃,再持续1-4小时升到保存温度20℃.,为成品.

离心;过柱。鉴定用ELISA。哦了

牛血清白蛋白的提取与鉴定
[样品] 小牛血清
[操作]
盐析:
取小 牛血清0.5毫升+PBS液0.5毫升+饱和硫酸铵2.3毫升,充分混匀,静止20分钟,2500转/分离心10分钟。
透析:
取玻璃纸一张,折成袋形,将离心后的上清液倒入袋内,用线扎紧上口(注意要留有空隙),放入装有自来水的小烧杯中透析,要不断振...

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牛血清白蛋白的提取与鉴定
[样品] 小牛血清
[操作]
盐析:
取小 牛血清0.5毫升+PBS液0.5毫升+饱和硫酸铵2.3毫升,充分混匀,静止20分钟,2500转/分离心10分钟。
透析:
取玻璃纸一张,折成袋形,将离心后的上清液倒入袋内,用线扎紧上口(注意要留有空隙),放入装有自来水的小烧杯中透析,要不断振动,每隔2分钟换一次水,共换水15次。
电泳:
1)点样
用两支毛细管分别将标准液及测定液点在同一张醋酸纤维素薄膜的无光泽面上(划好点样线并作好标记),标准液点一次,测定液点三次。
2)电泳
将点样后的膜条置于电泳槽架上,放置时无光泽面向下,点样端置于阴极,平衡5分钟,开电源160伏60分钟,关闭电源后用镊子将膜条取出。
3)染色
将膜条直接浸于盛有氨基黑10B的染料中,染2分钟取出,立即浸于漂洗液中,分别在漂洗液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中各漂洗5分钟,直至背景漂洗干净为止。
4.观察结果

收起

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