作业帮将目的基因导入动物细胞时,为什么先将含有目的基因的表达载体提纯,并使DNA浓度保持在1～3μg/mL为什么要提纯,不已经含有目的基因了吗?DNA浓度是怎么回事,变成DNA溶液了?为什么有液体?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/28 16:59:00
将目的基因导入动物细胞时,为什么先将含有目的基因的表达载体提纯,并使DNA浓度保持在1～3μg/mL为什么要提纯,不已经含有目的基因了吗?DNA浓度是怎么回事,变成DNA溶液了?为什么有液体?
将目的基因导入动物细胞时,为什么先将含有目的基因的表达载体提纯,并使DNA浓度保持在1～3μg/mL
为什么要提纯,不已经含有目的基因了吗?DNA浓度是怎么回事,变成DNA溶液了?为什么有液体?
将目的基因导入动物细胞时,为什么先将含有目的基因的表达载体提纯,并使DNA浓度保持在1～3μg/mL为什么要提纯,不已经含有目的基因了吗?DNA浓度是怎么回事,变成DNA溶液了?为什么有液体?
如果你是高中生,先这么记着吧,应该还没有高考考这么高级的.
如果你是大学生,那么是这样的：
含有目的基因的表达载体在感染细胞之前,需要进行扩增,然后再提取载体.在这个过程中,载体经常会受到蛋白或者有机溶剂等的污染,而这些东西对于细胞是由毒害的,所以在感染细胞之前,要先除去载体中的这些杂质,就是纯化这一步.
DNA（就是质粒载体）是溶解在水溶液或者buffer中的,然后与转染试剂混合,才能感染动物细胞,不然只是加入DNA是没有用的.
如果你已经大学毕业,并且从事这一方面工作,那我就班门弄斧了：
不是所有的纯化试剂盒提取的质粒都可以达到很好的转染效果,需要不断地尝试和更换不同的试剂盒和抽提方法,选择最好的才行.
在动物细胞转染时,DNA的浓度也是摸索出来的,DNA也有细胞毒性,而且不同的转染试剂用量是不同的.
具体实验要在缓冲溶液中进行，实验中目的基因与载体结合率不是100%，很低的。
载体不纯会影响蛋白表达，浓度指的是DNA在水溶液中的浓度，含有目的基因的载体在未导入细胞之前就是溶解在水中的。
第一个问题：不提纯，你怎么知道哪个是目的基因，哪个是非目的基因，这会增加后续工作的困难。
第二、三个问题：对，很多分子生物学的操作只能在液体中进行，所以必须是DNA溶解于液体中。