菌液pcr可以拉出目的条带,但是质粒抽出来酶切结果说是没有插进去,为什么?快抽验证是插入了片段,中抽抽了3次无果,小抽倒是有,可是显示没插入片段,但是菌液pcr怎么会有结果,诡异啊

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/14 16:19:50
菌液pcr可以拉出目的条带,但是质粒抽出来酶切结果说是没有插进去,为什么?快抽验证是插入了片段,中抽抽了3次无果,小抽倒是有,可是显示没插入片段,但是菌液pcr怎么会有结果,诡异啊

菌液pcr可以拉出目的条带,但是质粒抽出来酶切结果说是没有插进去,为什么?快抽验证是插入了片段,中抽抽了3次无果,小抽倒是有,可是显示没插入片段,但是菌液pcr怎么会有结果,诡异啊
菌液pcr可以拉出目的条带,但是质粒抽出来酶切结果说是没有插进去,为什么?
快抽验证是插入了片段,中抽抽了3次无果,小抽倒是有,可是显示没插入片段,但是菌液pcr怎么会有结果,诡异啊

菌液pcr可以拉出目的条带,但是质粒抽出来酶切结果说是没有插进去,为什么?快抽验证是插入了片段,中抽抽了3次无果,小抽倒是有,可是显示没插入片段,但是菌液pcr怎么会有结果,诡异啊
能确定菌液pcr出来的就是目的条带吗?如果确定,那就是可能质粒抽提和酶切这两步出了问题

应该是酶切的问题,你做单酶切试过没,这么草率的就说显示没插入片段,你是怎么分析的?问题可能会有很多,任何一点都有可能,你必须全列出来,现在的孩子太毛躁

直接抽质粒DNA酶切?

菌液PCR做空白对照试试。

菌液pcr可以拉出目的条带,但是质粒抽出来酶切结果说是没有插进去,为什么?快抽验证是插入了片段,中抽抽了3次无果,小抽倒是有,可是显示没插入片段,但是菌液pcr怎么会有结果,诡异啊 单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀 菌液pcr检测目的条带很明显但是有弱杂带是怎么回事 最近做了连接转化,挑平板上的菌落摇菌后提质粒,单酶切可以切开,而且质粒的大小明显小于空质粒然后用质粒稀释100倍后进行PCR,可以看到目的条带,但是有拖带.然后我继续将质粒稀释至500倍, 菌液PCR有条带,但提不出质粒,为什么? 分子克隆的时候,提出的质粒用菌落PCR是阳性的,但是酶切鉴定的时候却没有切出来目的条带,是怎么回事呢? 挑克隆鉴定时PCR有目的条带但是酶切没有做分子克隆时,铺板长出很多菌落,于是挑克隆鉴定.PCR扩增目的基因有目的条带,但是酶切重组质粒又只有一条带,酶切时间已经延长至过夜了.挑了好多 转化后菌液pcr有目的条带,然后提质粒和双酶切验证.但是没有得到目的条带.1.提质粒最后一步用的是elution buffer而不是水,这样有什么影响,如果有影响,现在如何补救?2.28a空质粒的位置应 质粒双酶切质粒大小正确,菌落PCR,也有条带,但是双酶切就是不成功,有什么建议吗? 关于T-A克隆的一些问题我做完了T-A克隆,提取质粒以后,用我的目的基因引物做PCR,跑电泳跑出来了目的条带,但是有一些杂带,是怎么回事呢. 重组质粒酶切后琼脂糖凝胶电泳未出现相应条带的原因有重组质粒的条带,但是没有酶切后的细菌质粒条带和目的基因条带.这样的情况原因是什么? 如何消除PCR的拖尾PCR扩增出来有目的条带,但是有拖尾,呈弥散片 为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急加点 kml?但是我转化后菌落长的还可以啊.酶切目的带在1000左右,质粒PCR在750左右了 PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带 PCR跑出的条带与目的条带不同怎么办 质粒PCR后电泳出现 很多条带 怎么回事啊? 质粒PCR后电泳出现 很多条带 怎么回事啊? 请问质粒双酶切时得到的目的条带较大是什么原因?质粒提取时电泳结果正常,但用Sph Ⅰ 、 Kpn Ⅰ对pGFP315双酶切时,得到的目的条带比正常的大,但是大片段正常,请问会是什么原因呢?