作业帮测酸性蛋白酶时如何溶解酪蛋白?小弟最近在用福林酚法测大曲中酸性蛋白酶活力,但用PH3.0乳酸-乳酸钠缓冲液配制1%酸性酪蛋白时,在沸水浴中始终不能完全溶解,在底部总有絮状沉淀.用该蛋白
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/29 07:13:54
测酸性蛋白酶时如何溶解酪蛋白?小弟最近在用福林酚法测大曲中酸性蛋白酶活力,但用PH3.0乳酸-乳酸钠缓冲液配制1%酸性酪蛋白时,在沸水浴中始终不能完全溶解,在底部总有絮状沉淀.用该蛋白
测酸性蛋白酶时如何溶解酪蛋白?
小弟最近在用福林酚法测大曲中酸性蛋白酶活力,但用PH3.0乳酸-乳酸钠缓冲液配制1%酸性酪蛋白时,在沸水浴中始终不能完全溶解,在底部总有絮状沉淀.用该蛋白溶液进行水解后和空白液（1ml酶液+1ml三氯乙酸+所配1%酸性酪蛋白）在相同条件下离心显色,都显蓝色,在680nm条件下测吸光度也只有0.039,不在要求的0.2到0.4的范围之内.望各位大侠赐教.
测酸性蛋白酶时如何溶解酪蛋白?小弟最近在用福林酚法测大曲中酸性蛋白酶活力,但用PH3.0乳酸-乳酸钠缓冲液配制1%酸性酪蛋白时,在沸水浴中始终不能完全溶解,在底部总有絮状沉淀.用该蛋白
我上学的时候做过这个实验,而且是我硕士论文的实验.
当时和你一样,怎么都溶解不完全,很抓头.
后来发现,为什么要让酪蛋白溶解完全呢?蛋白酶测定只要最后有酪蛋白被酶分解就可以显色了啊,溶解多少用多少呗.
于是,按照实验方法溶解了一些酪蛋白,然后离心,取上清做实验.结果很好.
不知道咱俩的情况是不是一样,参考一下吧
补充一下,你的最后OD是不是以三氯乙酸的做空白的?那么OD低有两种可能,第一,你测的酶确实不行,酶活太低；二,你的样品不纯,里边含有酪氨酸.我当时就遇到过第二种情况,导致OD极低
我是做胃蛋白酶测定，用的3.6的醋酸缓冲液，仍然不溶。第一次测定时不溶，然后将就做，可是测出来活性才1：900，可是瓶子上标注的是1：3000啊- -（sigma公司的）我也不知道是不是因为放了将近一年酶活降低，可是也不至于降那么多啊- -
我在称量酪蛋白后先加了几滴乳酸，然后再用0.1mol/lNaOH溶液溶解，在加热的情况下能全溶，可是最后要求定容时用酸性缓冲液，它就全部成为絮状沉淀了...
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我是做胃蛋白酶测定，用的3.6的醋酸缓冲液，仍然不溶。第一次测定时不溶，然后将就做，可是测出来活性才1：900，可是瓶子上标注的是1：3000啊- -（sigma公司的）我也不知道是不是因为放了将近一年酶活降低，可是也不至于降那么多啊- -
我在称量酪蛋白后先加了几滴乳酸，然后再用0.1mol/lNaOH溶液溶解，在加热的情况下能全溶，可是最后要求定容时用酸性缓冲液，它就全部成为絮状沉淀了，于是还是只能用酸性溶液溶解，可是在酸性清况下，无论如何它也不溶。。现在也在抓头中- -
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