作业帮标记基因的作用质粒上有两个或两个以上标记基因的作用是什么?未导入目的基因之前,质粒上已经有标记基因,那无论是否导入目的基因,用选择培养基筛选不是都有抗性吗,那还怎么区分重组
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/09 07:57:05
标记基因的作用质粒上有两个或两个以上标记基因的作用是什么?未导入目的基因之前,质粒上已经有标记基因,那无论是否导入目的基因,用选择培养基筛选不是都有抗性吗,那还怎么区分重组
标记基因的作用质粒上有两个或两个以上标记基因的作用是什么?
未导入目的基因之前,质粒上已经有标记基因,那无论是否导入目的基因,用选择培养基筛选不是都有抗性吗,那还怎么区分重组质粒与普通质粒?
标记基因的作用质粒上有两个或两个以上标记基因的作用是什么?未导入目的基因之前,质粒上已经有标记基因,那无论是否导入目的基因,用选择培养基筛选不是都有抗性吗,那还怎么区分重组
质粒上有两个或两个以上标记基因是为了使用方便.而且两个标记基因的功能是不一样的.比如我们最常用的PUC18/19等,一个是氨苄抗性,另一个是LAC Z基因.
前一个基因的存在,让我们在培养时加入氨苄可以让细菌时刻把这个质粒带着,如果不加氨苄,细菌肯定会把这个质粒丢掉的（毕竟质粒相对于细胞来说是一个包袱,但当氨苄存在时,如果细菌把质粒丢了,细菌便不能抗氨苄而被杀死）.
而LAC Z基因是为我们插入目的基因筛选而用的.LAC Z基因本身在IPTG和x-gal的作用下,而产生兰斑.而且这个基因上有很多的酶切位点,方便我们插入自己想要的基因.而我们的基因插入后,把LAC Z基因破坏了,不能产生兰斑.这就是兰白斑筛选.
区分重组质粒与普通质粒的方法有很多，比如利用α-互补原理进行蓝白斑筛选，利用插入失活原理进行双抗筛选，以及针对插入目的片段功能的底物筛选等。对于一般的质粒载体，则可随机挑取单菌落，采取菌落PCR、southern blot、质粒抽提及酶切等方法来判断是否重组质粒。...
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区分重组质粒与普通质粒的方法有很多，比如利用α-互补原理进行蓝白斑筛选，利用插入失活原理进行双抗筛选，以及针对插入目的片段功能的底物筛选等。对于一般的质粒载体，则可随机挑取单菌落，采取菌落PCR、southern blot、质粒抽提及酶切等方法来判断是否重组质粒。
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在插入位点两边设计引物PCR，看电泳条带大小，或者直接测序看是不是目标序列
或者双酶切，再电泳看看导入进去了没，质粒上应该有酶切位点的吧
检测标记基因，就是看一看质粒是不是已经转入了，在此基础上还要进行目的基因的检测，mRNA的检测和表达产物的检测，分别利用DNA分子杂交，DNA-RNA分子杂交，以及抗原抗体杂交
跟你简单的说吧
首先质粒是细菌拟核裸露DNA外的遗传物质，真核细胞是没有质粒的，目的基因先与质粒连接，经过一定的方法鉴定，一般是酶切、电泳，看目的基因是否与质粒连接上，将连接成功的重组质粒导入受体细胞，这里的受体细胞一般是真核细胞，如果带标记基因的重组质粒导入细胞了就可以用选择培养基筛选了。...
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跟你简单的说吧
首先质粒是细菌拟核裸露DNA外的遗传物质，真核细胞是没有质粒的，目的基因先与质粒连接，经过一定的方法鉴定，一般是酶切、电泳，看目的基因是否与质粒连接上，将连接成功的重组质粒导入受体细胞，这里的受体细胞一般是真核细胞，如果带标记基因的重组质粒导入细胞了就可以用选择培养基筛选了。
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